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高效液相色谱分离红曲色素组分的研究
发布者:     浏览次数:1841     发布时间:2015-4-21
高效液相色谱分离红曲色素组分的研究 

来源:中国净化设备网 
  高效液相色谱分离红曲色素组分的研究钟立人,毕丽君(杭州商学院食品科学与工程系,浙江杭州035)果证明除存在六种脂溶性色素外,还存在红色水溶性色素成分。)是红曲菌( monascus spp. )产生的色素,这种天然色素由于具有较强的耐光、耐热,对酸碱、氧化剂、还原剂均较稳定,且几乎不受Ca等金属离子的影响,在我国古代就用于食品着色,至今仍在使用,是我国食品法规允许使用的食用色素之一,广泛用于肉制品、豆制品、糖、果酱和果汁等的着色。据文献报道[ 1、2],红曲色素为混合物,均不溶于水,可溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,其主要成份为:红曲素( C)、黄红曲素( C)、红斑红曲素( C)、红曲玉红素( C)、红斑红曲胺( C)和红曲玉红胺( C为了进一步开发红曲色素在食品加工工业中的应用,有必要进一步搞清楚红曲色素混合物中的各组分及它们的溶解性能、稳定性等,本实验应用高效液相色谱仪分析经各种有机溶剂萃取的样品溶液,分离得到20余种组分,证明除存在上述六种脂溶性色素组分外,还存在水溶性色素成分(呈红色) ,且成分较多。
  1实验部分1. 1色素的萃取在水中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得紫红色素溶液在己烷、庚烷或苯中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得橙黄色素溶液以氯仿萃取上述除去橙黄色素的沉淀,可得紫红色溶液在乙醇或丙酮中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得紫红色素溶液。本实验对红曲米样品用正己烷及氯仿反复萃取至无色后,再用无水乙醇萃取得红色素,可知红曲米色素中还含有水溶性色素。
  1. 2液相色谱分析1. 2. 1材料与设备红曲(福建古田) 高效液相色谱仪( Waters公司) , XS色谱数据工作站(杭星电脑有限公司) 试剂均为分析纯。
  化学世界1. 2. 2样品处理红曲米经粉碎后,用不同溶剂萃取,萃取液均用0. 45 Lm的膜过滤后,再进行HPLC分析。
  1. 2. 3实验条件80甲醇水溶液。
  2分析结果2. 1两种色谱柱分析结果的比较由于红曲色素各脂溶性组分分子结构的差别,在C18和Phenyl柱上的选择性有所不同,见图1和柱对共轭双键有差别的物质分离较好,但如仅取代基不同时,分离不很好,图2中后面可看到四个较大的峰,收集的前两个馏分( 1, 2)为紫红色,后两个( 3, 4和5, 6)为黄色,其中前两个峰在柱上分离仍为两个峰,而后两个峰在C18柱上分离为后面的四个峰。由于柱对基不同的异构体分离度较好,因此Phenyl柱(图2)上的后两个峰应各是两种异构体,根据其颜色、分子结构中共轭情况、相对分子质量和色谱选择性,可判断3号峰为红曲素、4号峰为黄红曲素、5号峰为红斑红曲素和6号峰为红曲玉红素,而前两个峰( 1, 2)为红斑红曲胺和红曲玉红胺。
  2. 2溶剂和色素成分色谱图中前10 min所出峰对应于红曲米的水溶性色素成分,这可以从水萃取物的分析得到证实,见图3.这一点与色谱的选择性一致,而非水溶性色素成分均在10 min之后出峰,图4是苯萃取物的色谱图,庚烷和石油醚与苯类同。庚烷、石油醚和苯均只能萃取出后两组黄色素( 4种) ,余下的主要非水溶性色素成分为色谱峰1和2,从颜色、分子结构中共轭情况、相对分子质量和色谱选择性来看, 1号峰是红斑红曲胺, 2号峰为红曲玉红胺。
  甘纯玑,陈健,叶友辉。中国粮油学报, 1990, 5( 1) :化学世界
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